apteka eskulap pabianice

Wirus zapalenia wątroby typu B (HBV) to mały wirus DNA o zwartej strukturze genomowej. Wszystkie zidentyfikowane do tej pory białka HBV zostały zakodowane przez RNA RNA o niezakłóconym składzie. Łączone RNA HBV zostały opisane, ale ich funkcje są nieznane. Pokazujemy tutaj, że RNA HBV pojedynczo łączone koduje nowe białko HBV in vivo. To białko generowane przez splot HBV (HBSP) odpowiada fuzji części wirusowej polimerazy i nowej otwartej ramki odczytu, która jest tworzona przez zdarzenie splicingu. In vivo, białko HBSP zostało znalezione w próbkach wątroby zakażonych HBV, a przeciwciała anty-HBSP wystąpiły w jednej trzeciej próbek surowicy pobranych od przewlekłych nosicieli HBV. In vitro ektopowa ekspresja HBSP nie miała wpływu na replikację lub transkrypcję wirusowego DNA, ale indukowała apoptozę komórki bez bloku cyklu komórkowego. Ogólnie nasze wyniki sugerują, że HBV wyewoluował mechanizm, który bezpośrednio moduluje interakcje wirus-komórka poprzez splicing RNA. Wprowadzenie Wirus zapalenia wątroby typu B (HBV) jest małym, otoczonym wirusem DNA, który powoduje ostre i przewlekłe infekcje wątroby (1). Genom wirusa zawiera 4 zachodzące na siebie otwarte ramki odczytu kodujące kapsyd, powierzchnię, polimerazę i białka X (1). Trzy główne nie sklasyfikowane transkrypty: 3,5 kb, 2,4 kb i 2,1 kb oraz mniej obfity transkrypt 0,8 kb ze wspólnym miejscem poliadenylacji, wszystkie kody dla zidentyfikowanych do tej pory białek wirusowych. Pregenomowy RNA o wielkości 3,5 kb służy również jako matryca do replikacji wirusa poprzez mechanizm odwrotnej transkrypcji. Ponadto, zidentyfikowano transkrypty HBV po sklejeniu w ludzkich tkankach wątroby i w liniach komórkowych wątrobiaka transfekowanego HBV (2. 8). Dwie główne formy pregenomicznego RNA w postaci splicingowej HBV, każda o wielkości 2,2 kb, zostały znalezione in vitro, co stanowi około 30% pregenomowych RNA (5). RNA łączone są również wykrywane u kaczek i kaczek zarażonych wirusem zapalenia wątroby typu B lub wirusem zapalenia wątroby typu woodchuck. Jednakże, wzór splicingu różnił się pomiędzy tymi hepadnawirusami (9. 11). My i inni wykryliśmy wadliwe cząstki HBV zawierające subgenomowe DNA HBV o 2,2 kb, komplementarne do pojedynczego RNA wirusa HBV, w większości wątroby i surowicy od pacjentów z przewlekłą infekcją (4, 12, 13). Te wadliwe cząstki HBV są wydzielane przez transkomplementację wirusem pomocniczym typu dzikiego, co pozwala na pakowanie i odwrotną transkrypcję pojedynczo splicowanego RNA (4). Stwarza to możliwość, że te wadliwe cząstki HBV i ich eksprymowane białka mogą być związane z utrzymaniem wirusa. Wykazano uprzednio, że RNA z pojedynczym splicingiem koduje białka kapsydu i X (12). Ponadto zawiera nowatorską otwartą ramkę odczytu zachodzącą na łączenie splotów, które potencjalnie koduje białko generowane przez splicing HBV (HBSP). Białko to, z 93 aminokwasami, zaczyna się od kodonu startu polimerazy i obejmuje pierwsze 46 aminokwasów polimerazy, a następnie 47 aminokwasów odpowiadających nowej sekwencji aminokwasów HBV generowanej przez przesunięcie ramki odczytu (Figura 1a). W tym raporcie wykazujemy ekspresję in vivo tego nowego białka. Figura (a) Schematyczne przedstawienie pojedynczo splicowanego RNA HBV i produktu translacji HBSP. (b) Do góry: Pośredni test ELISA do wykrywania przeciwciał anty-HBSP w surowicy od przewlekłych nosicieli HBV (n = 45), w prawidłowych kontrolach surowicy (NS, n = 45) oraz w surowicy pacjentów z HCV (n = 45) ), autoimmunologiczne zapalenie wątroby (AIH, n = 17) i przewlekła alkoholowa marskość wątroby (AC, n = 25). Dół: Pole wykresu przedstawia dane ELISA. (c) Analiza biopsji wątroby metodą Western blot. U góry: wykryto HBSP (stosując poliklonalne przeciwciała przeciwko HBSP skierowane przeciwko białku rekombinowanym HBSP) w 4 wątrobach zakażonych HBV (ścieżki 3. 6), 2 wątrobach zakażonych HCV (ścieżki 2 i 7) i normalnej wątrobie ( ścieżka 1)
[hasła pokrewne: tomasz pągowski wikipedia, eskulap pabianice, tormentiol trądzik ]