centermed niepubliczny zakład opieki zdrowotnej centrum medyczne kraków

W tej samej serii eksperymentów średni znormalizowany szczep jądrowy w Lmna. /. komórki były znacznie wyższe (0,629. 0,055; p <0,001 w porównaniu z typem dzikim). Figura 7Lmna + / + i komórki LmnaLCO / + wykazują większe odkształcenie jądrowe przez odkształcenie dwuosiowe niż komórki typu dzikiego. Dwuosiowy szczep zastosowano w dzikiego typu, LmnaLCO / +, Lmna + / + i Lmna A /. komórki i stopień deformacji jądrowej zmierzono i wyrażono jako stosunek szczepu jądrowego do szczepu błonowego (znormalizowany szczep jądrowy). Komórki LmnaLCO / + i Lmna + / + wykazywały mały, ale statystycznie istotny wzrost znormalizowanego szczepu jądrowego w porównaniu z komórkami typu dzikiego (P <0,001, test t niesparowany z poprawką Welcha). Korygowanie fenotypów komórkowych i chorobowych w Zmpste24. /. myszy przez zakłócanie syntezy prelamin A. Zmpste24. /. myszy manifestują nagromadzenie farnezylo-prelaminy A w otoczce jądrowej, rozwijają zniekształcone jądra i wykazują wiele fenotypów choroby podobnej do progerii (np. osteolityczne zmiany w kościach, łysienie i zredukowany podskórny tłuszcz) (14). Podejrzewaliśmy, że wszystkie nieprawidłowości były spowodowane nagromadzeniem farnezylo-prelaminy A zamiast nieobecności laminatu A. Przewidywaliśmy, że będziemy w stanie wyleczyć. Zmpste24. /. myszy, zarówno na poziomie komórkowym jak i zwierzęcym, poprzez wprowadzenie allelu LmnaLCO, ponieważ interwencja ta zmniejszyłaby akumulację prelaminy A w komórkach. Rzeczywiście, ta prognoza została podtrzymana. Na poziomie komórkowym, pierwotne fibroblasty zarodkowe Zmpste24 (3 / + LmnaLCO / + i Zmpste24 p / m Lmna + / + miały o wiele mniej zniekształconych jąder niż fibroblasty z miotu Zmpste24. /. zarodki (p <0,0001, test 2, fig. 8). Na poziomie całego zwierzęcia wpływ allelu LmnaLCO był jeszcze bardziej dramatyczny. Myszy Zmpste24 (3 / LmnaLCO / + i Zmpste24 (3 /> Lmna + / + były fenotypowo normalne, przy prawidłowych szybkościach wzrostu i sile przyczepności nie do odróżnienia od myszy typu dzikiego (Figura 9). W przeciwieństwie do wszystkich Zmpste24. /. myszy wykazywały znacznie opóźniony wzrost i osłabioną siłę uchwytu w wieku 4 miesięcy. Bez wyjątku, Zmpste24. /. myszy zmarły lub wymagały eutanazji do 28 tygodnia życia, podczas gdy wszystkie myszy Zmpste24a / LmnaLCO / + były żywe, płodne i zdrowe w tym wieku (Figura 9). Jak oceniano za pomocą skanu CT, mysz Zmpste24 (3 / / Lmna + / + była całkowicie wolna od nieprawidłowości kości (Figura 3). Figura 8 Pojedynczy allel LmnaLCO zmniejsza liczbę zniekształconych jąder w pierwotnym Zmpste24. /. mysie zarodkowe fibroblasty. Pierwotne fibroblasty zarodkowe wyizolowano z zarodków wytworzonych z krzyżówek Zmpste24 + /. LmnaLCO / +. Komórki zabarwiono przeciwciałami L2 / L i LAP2, a liczbę komórek z nieprawidłowo ukształtowanymi jądrami określono metodą mikroskopii fluorescencyjnej. Słupki pokazują średnią częstotliwość zniekształconych jąder; liczba zniekształconych jąder i całkowita liczba zbadanych jąder są rejestrowane w każdym takcie. Wykres słupkowy podsumowuje dane z 2 niezależnych eksperymentów (wypełnione kółka). P <0,001, Zmpste24. /. kontra Zmpste24. /. LmnaLCO / + lub Zmpste24. /. Lmna + / +. Figura 9 Stawki wzrostu, siła chwytu i przeżycie Zmpste24. /. LmnaLCO / + i Zmpste24. /. myszy. Heterozygoty złożone (Zmpste24 + / P LmnaLCO / +) krzyżowano w celu wytworzenia ściółki zmpste24 (3 / / LmnaLCO / + i myszy Zmpste24a / / Lmna + / +. (A) Stopa wzrostu męskiego Zmpste24. /. myszy (n = 4) były opóźnione, podczas gdy myszy Zmpste24a / LmnaLCO / + (n = 5) wykazywały normalny wzrost nie do odróżnienia od myszy typu dzikiego (n = 7). Podobne wyniki otrzymano dla samców myszy Zmpste24 (3 (Lmna + / + (nie pokazano). (B) Siła chwytu w 17-tygodniowym typie dzikim (n = 7), Zmpste24. /. (n = 4) i myszy Zmpste24. /. LmnaLCO / + (n = 5), jak oceniono na podstawie czasu, w którym mogły zawiesić się do góry nogami z siatki (14) [więcej w: tormentiol trądzik, neorutin c, olx pińczów ]