Niestabilność mikrosatelitu guza i wyniki kliniczne u młodych pacjentów z rakiem jelita grubego cd

Z wyjątkiem przedoperacyjnego poziomu antygenu rakowo-płodowego w surowicy, uwzględniliśmy wszystkie czynniki kategorii I Kolegium Amerykańskich Patologów (stadium patologiczne, typ komórek nowotworowych, stopień nowotworu oraz obecność lub nieobecność zaocznej inwazji żylnej), które są dobrze wsparte w literaturze i są ogólnie stosowane w opiece nad pacjentem.31 Wszystkie próbki przeszły ocenę histopatologiczną przez pojedynczego patologa, który nie był świadomy wyników molekularnych testów genetycznych. Zgodnie z klasyfikacją nowotworów dokonaną przez Światową Organizację Zdrowia, 32 zdefiniowaliśmy nowotwory jako komórki sygnetowe lub śluzowe, jeśli 50 procent lub więcej guza wykazuje określony typ komórek i jako niezróżnicowane, jeśli nie ma cech różnicowania komórek nowotworowych. Inne nowotwory zostały sklasyfikowane jako gruczolakorak, nieokreślony inaczej lub, w rzadkich przypadkach, rak gruczołowo-płaskonabłonkowy, jeśli obecne były złośliwe elementy łuskowate i gruczołowe. Odległe przerzuty zostały uznane za obecne, jeśli pojawiły się w próbce histopatologicznej lub jeśli zostały zidentyfikowane przez Ontario Cancer Registry w ciągu 120 dni od rozpoznania. Łącznie 103 ze 138 przypadków przerzutów odległych narządów (75 procent) zostało potwierdzonych badaniem histopatologicznym. Leczenie radiacyjne w Ontario odbywa się wyłącznie w dziewięciu specjalistycznych ośrodkach leczenia onkologicznego, które zgłaszają się do Ontario Cancer Registry. Dane dotyczące radioterapii rozpoczęte w ciągu 120 dni po diagnozie zostały wyodrębnione z rejestrów Ontario Cancer Registry i były dostępne dla wszystkich badanych pacjentów. Chemioterapia z powodu raka może być podawana w ośrodkach leczenia onkologicznego lub w innych szpitalach i klinikach w prowincji. Informacje o chemioterapii zapoczątkowanej w ciągu 120 dni po diagnozie uzyskano z baz danych zarówno Ontario Cancer Registry, jak i Ontario Institute for Clinical Evaluative Sciences i było dostępne dla 392 z 607 badanych pacjentów (65 procent).
Przygotowanie DNA, testowanie mikrosatelitarne i analiza
Blokom chirurgicznie wyciętej tkanki nowotworowej, które utrwalono w formalinie i zatopiono w parafinie, wymagano od odpowiednich oddziałów patologii dla wszystkich pacjentów. Dla każdej próbki, regiony inwazyjnego raka z najwyższym odsetkiem komórek nowotworowych (mediana, 80 procent, zakres, 40 do 100 procent) i prawidłową tkanką były mikrosadzeniane, a DNA ekstrahowano przez trawienie proteinazą K. 33 próbek genomowego DNA użyto do amplifikacji sekwencji (przez łańcuchową reakcję polimerazy [PCR]) od 5 do 10 następujących loci mikrosatelitycznych mononukleotydu i dinukleotydu: BAT-25, BAT-26, D5S346, D2S123, D17S250, BAT-40, TGF-.RII, D18S58 , D18S69 i D17S787 (Human MapPairs, Research Genetics, Huntsville, Ala.). Te specyficzne loci mikrosatelitarne pochodziły z referencji National Cancer Institute i alternatywnego panelu loci w celu zapewnienia ustandaryzowanych ustaleń.34 Sekwencje startera i warunki testu PCR i elektroforezy żelowej zostały już opublikowane.33,35
Obecność dodatkowych prążków w produkcie PCR z DNA nowotworu nie obserwowano w DNA z prawidłowej tkanki od tego samego pacjenta, oceniano jako niestabilność w tym konkretnym locus
[przypisy: radioskopia, stolec owczy, usuwanie ósemek lublin ]
[więcej w: ból kolana po bieganiu, duofilm cena, gumtree bochnia ]